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フローサイトメトリー

最先端の分析フローサイトメトリーリソースにより、医薬品開発ニーズのあらゆる側面をサポートします。

がんの研究と治療における最新のブレークスルーは免疫腫瘍学の分野であり、新しい免疫療法を使用して宿主の免疫システムを強化し、腫瘍細胞をより効果的に標的にして破壊します。 免疫調節活性を有するFDA承認の治療薬のリストには、抗体およびサイトカインベースの免疫療法、低分子医薬品、細胞ベースの治療法などがある。 これらの治療法やその他の治療法が生存期間の延長に成功したことで、がんの治療においてより有効性の高い新しい単剤療法および併用療法の開発に重点が置かれています。

免疫療法の生産的な開発には、腫瘍微小環境、末梢血、およびその他の宿主組織における免疫系のハイスループットで堅牢な定量分析が必要です。

このニーズを満たすために、当社の受託フローサイトメトリーサービスは、医薬品開発ニーズのあらゆる側面をサポートする高度で最先端の分析フローサイトメトリーリソースを提供します。 サンプル生成研究を当社で実施するか、前臨床または非CLIA規制の臨床サンプルを夜間に発送していただければ、当社がフローサイトメトリーを担当いたします。

基本的な免疫プロファイリングから包括的な免疫プロファイリング

50年以上にわたる専門知識を組み合わせた当社のフルサービスの分析チームは、in vivo研究にex vivoフローサイトメトリーアームを追加することができます。     当社の標準化された抗体パネルのリスト(下記参照)は、複数のin vivoがんモデルで検証されており、インビボ試験剤治療によって引き起こされる免疫応答に発生するシフトを捉えるために、幅広いリンパ系および骨髄系統免疫サブセットの基礎から包括的な分析を提供します。     以下のパネルのリストを参照してください。

CD4+、CD8+、および制御性T細胞分析と、T細胞パネルを使用した免疫チェックポイント/活性化マーカーの調査の組み合わせ

包括的T細胞パネルは、Basic、Regulatory、T細胞活性化/枯渇パネルの有用性を組織内のT細胞プロファイルの1つの包括的な分析に統合しています。 上記のデータは、(A)4T1乳癌モデルを用いたマウス腫瘍におけるCD4+/CD8+ T細胞サブセット解析、(B)CT.26結腸直腸腺癌保有マウスの脾臓における制御性T細胞解析、および(C)A20(B細胞リンパ腫)細胞株由来腫瘍のT細胞サブセットにおけるCTLA-4、PD-1、およびKi-67発現レベルを示しています。

マウスひ臓におけるT細胞とB細胞サブセットの解析

ベーシックT&B細胞パネルは、不均一サンプル中のCD4+およびCD8+ T細胞、およびB細胞画分の定量に利用できます。 このパネルによって占められる蛍光チャネルは6つだけであり、追加の抗体をドロップすることでさらなる細胞特性評価に利用できるチャネルがいくつか残ります。 上記の研究では、CD3+ T細胞とCD19+ B細胞をLive Cellゲートで分析しました。 T細胞はさらにCD4+集団とCD8+集団に細分化されました。

マウスA20 B細胞リンパ腫モデルにおけるT細胞活性化の解析

新しい免疫療法の開発中に直面した課題の1つは、腫瘍微小環境内のT細胞で発生する抗腫瘍活性の喪失を克服することです。 T細胞枯渇と呼ばれる状態で、さまざまな免疫チェックポイントと活性化マーカーの相対的な発現に基づいて識別できます。 T細胞活性化/枯渇パネルは、ベーシックT細胞パネルの拡張であり、さまざまな組織における選択された主要なバイオマーカーの発現を測定するために使用できます。 上記の研究では、免疫チェックポイントタンパク質CTLA-4およびPD-1、および代理増殖マーカーKi-67の発現が、A20細胞株由来腫瘍内のT細胞サブセットで測定されました。

マウスA20 B細胞リンパ腫モデルにおけるT細胞活性化の解析

新しい免疫療法の開発中に直面した課題の1つは、腫瘍微小環境内のT細胞で発生する抗腫瘍活性の喪失を克服することです。 T細胞枯渇と呼ばれる状態で、さまざまな免疫チェックポイントと活性化マーカーの相対的な発現に基づいて識別できます。 T細胞活性化/枯渇パネルは、ベーシックT細胞パネルの拡張であり、さまざまな組織における選択された主要なバイオマーカーの発現を測定するために使用できます。 上記の研究では、免疫チェックポイントタンパク質CTLA-4およびPD-1、および代理増殖マーカーKi-67の発現が、A20細胞株由来腫瘍内のT細胞サブセットで測定されました。

CD4+、CD8+、および制御性T細胞分析と、T細胞パネルを使用した免疫チェックポイント/活性化マーカーの調査の組み合わせ

包括的T細胞パネルは、Basic、Regulatory、T細胞活性化/枯渇パネルの有用性を組織内のT細胞プロファイルの1つの包括的な分析に統合しています。 上記のデータは、(A)4T1乳癌モデルを用いたマウス腫瘍におけるCD4+/CD8+ T細胞サブセット解析、(B)CT.26結腸直腸腺癌保有マウスの脾臓における制御性T細胞解析、および(C)A20(B細胞リンパ腫)細胞株由来腫瘍のT細胞サブセットにおけるCTLA-4、PD-1、およびKi-67発現レベルを示しています。

CT.26結腸直腸腺癌モデルにおけるナチュラルキラー(NK)細胞および樹状細胞(DC)サブセット解析

NK細胞サブセットは、その抗腫瘍活性と多くの腫瘍の増殖を制御する能力でよく知られています。 DCは腫瘍促進機能と抗腫瘍機能の両方を持ち、ワクチンベースの免疫療法の標的です。 NKDC(別名IKDC)は、NK細胞とDCの両方の機能的特徴を持っていることが示されています。 ナチュラルキラー細胞パネルを使用して、これらのサブセットを識別できます。 上記の研究は、腫瘍由来のLy6G-Ly6C- 免疫細胞内のNK細胞、DC、およびNKDCサブセットの割合を定量化するために実施されました。

マウスCT.26結腸直腸腫瘍モデルにおける骨髄由来サプレッサー細胞(MDSC)解析

MDSCサブセットは、免疫機能の抑制を含むいくつかの腫瘍誘発性応答に影響を与える可能性があり、免疫療法の魅力的な標的です。 それらは不均一な細胞集団です。 その表現型は、腫瘍微小環境のシグナルによって形成される可能性があります。 上記のデータは、CT.26由来腫瘍における顆粒球 (G-) および単球 (M-) MDSCサブセットの基本的な同定にMDSCパネルをどのように使用できるかを示しています。 CD11b+ 骨髄細胞は、CD3+CD19+ リンパ球排除後のCD45+ ゲートで最初に同定されました。 G-MDSCとM-MDSCは、Ly-6GおよびLy-6C表面受容体の発現に基づいてさらに区別されました。

マウスCT.26結腸直腸腫瘍モデルにおける骨髄由来サプレッサー細胞(MDSC)、ナチュラルキラー(NK)細胞、樹状細胞(DC)サブセットの解析

拡張骨髄パネルは、基本的なMDSCパネルを拡張したもので、MDSC集団に加えてNKおよびDCサブセットの分析を可能にします。 示されたデータでは、これらのサブセットはCT.26由来の腫瘍で分析されました。 単球 (M-) および顆粒球 (G-) MDSCは、それぞれ高レベルのLy-6CおよびLy-6Gタンパク質を発現し (Bright)、CD11bマーカーを共発現します。 NKとDCはMDSC排除ゲートで分析され、汎NKマーカー(CD49bおよびCD335)とDC特異的CD11cタンパク質の発現に基づいてさらに区別されました。 赤と灰色のピークは、それぞれCD11b染色細胞と未染色細胞を表します。

MI Bioresearch Comprehensive Myeloid Panelを使用した腫瘍における骨髄細胞解析

Comprehensive Myeloid Panelは、骨髄細胞集団のより詳細な分析のために、Basic Myeloid-Derived Suppressor Cell Panelに基づいて構築されています。 また、腫瘍と免疫細胞の両方のサブセットに対する免疫阻害受容体PD-L1の分析も可能になります。 上記のデータは、包括的な骨髄パネルを使用して、A)腫瘍および免疫細胞でのPD-L1発現を測定する方法(4T1乳がんモデル)、B)マクロファージおよび樹状細胞サブセットを定量化する(CT.26結腸直腸がんモデル)、およびC)抑制活性と直接相関することが示されている受容体であるCD115の発現を解析するMDSCサブセットを解析する方法を示している(CT.26結腸直腸がんモデル)。 このパネルは、好中球および単球集団の分析にも役立ちます(図示せず)。 赤と灰色のピークは、それぞれ標的抗原で染色された細胞と未染色の細胞を表します。

CT.26結腸直腸がんモデルにおける古典的(M1)および代替的(M2)活性化腫瘍関連マクロファージの解析

M1マクロファージとM2マクロファージは、腫瘍微小環境内に存在する2つの主要なマクロファージ グループです。 それらはがんの進行に関して反対の機能を持っているため、新しい免疫療法の標的です。 上記の研究は、M1およびM2腫瘍関連マクロファージパネルを使用してこれら2つのグループの比率をプロファイリングする方法を示しています。 この目的のために、CD11b+/F480+ マクロファージを同定できるように、MDSCサブセットを除外しました。この画分は、M2マクロファージ (CD206+) およびM2マクロファージ (CD206-MHCII+) について分析されました。

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事前に検証されたスペクトルパネルとスペクトルフローサイトメトリーの専門知識を活用して、データの明瞭さを向上させ、柔軟性を高め、小さなサンプルからインパクトのある結果を生成します。