癌症研究和治疗的最新突破是在免疫肿瘤学领域，使用新型免疫疗法来增强宿主的免疫系统，从而更有效地靶向和破坏肿瘤细胞。 FDA 批准的具有免疫调节活性的疗法包括基于抗体和细胞因子的免疫疗法、小分子药物和基于细胞的疗法。 这些疗法和其他疗法在延长生存期方面取得的成功使人们更加重视开发在治疗癌症方面具有更高疗效的新型单药和联合疗法。
免疫疗法的高效开发需要对肿瘤微环境、外周血和其他宿主组织中的免疫系统进行高通量和稳健的定量分析。
为了满足这一需求，我们的合同流式细胞术服务为您提供最先进的分析流式细胞术资源，以支持您药物开发需求的各个方面。 在我们这里进行您的样品制备研究，或将您的临床前或非 CLIA 监管的临床样品隔夜运送给我们，我们将为您进行流式细胞术。
凭借 50 多年的综合专业知识，我们的全方位服务分析团队可以在任何 体内 研究中添加 体外 流式细胞术分支。 我们的标准化抗体组合列表（见下文）已在多种 体内 癌症模型中得到验证，并提供从基础到全面的分析，以捕捉由体内 测试剂治疗引 发的免疫反应变化。 请参阅下面的抗体组合列表。
综合 T 细胞面板将基本、调节和 T 细胞激活/耗竭面板的实用性结合到对组织内 T 细胞谱的综合分析中。 上述数据显示了（A）使用 4T1 乳腺癌模型在小鼠肿瘤中的 CD4+/CD8+ T 细胞亚群分析，（B）携带 CT.26 结直肠腺癌小鼠脾脏中的调节性 T 细胞分析，以及（C）来自 A20（B 细胞淋巴瘤）细胞系衍生肿瘤的 T 细胞亚群中的 CTLA-4、PD-1 和 Ki-67 表达水平。
基础 T 和 B 细胞面板可用于定量异质样品中的 CD4+ 和 CD8+ T 细胞以及 B 细胞组分。 该面板仅占用 6 个荧光通道，这留下了几个通道，可以通过加入额外的抗体来进一步表征细胞。 在上述研究中，在活细胞门中分析了 CD3+ T 细胞和 CD19+ B 细胞。 T 细胞进一步细分为 CD4+ 和 CD8+ 亚群。
在开发新的免疫疗法过程中面临的一个挑战是克服肿瘤微环境中 T 细胞中发生的抗肿瘤活性的丧失。 一种称为 T 细胞耗竭的状态，可以根据不同免疫检查点和激活标志物的相对表达来识别。 T 细胞活化/耗竭组合是基础 T 细胞组合的扩展，可用于测量不同组织中选定关键生物标志物的表达。 在上述研究中，测量了 A20 细胞系衍生肿瘤内 T 细胞亚群中免疫检查点蛋白 CTLA-4 和 PD-1 以及替代增殖标志物 Ki-67 的表达。
在开发新的免疫疗法过程中面临的一个挑战是克服肿瘤微环境中 T 细胞中发生的抗肿瘤活性的丧失。 一种称为 T 细胞耗竭的状态，可以根据不同免疫检查点和激活标志物的相对表达来识别。 T 细胞活化/耗竭组合是基础 T 细胞组合的扩展，可用于测量不同组织中选定关键生物标志物的表达。 在上述研究中，测量了 A20 细胞系衍生肿瘤内 T 细胞亚群中免疫检查点蛋白 CTLA-4 和 PD-1 以及替代增殖标志物 Ki-67 的表达。
综合 T 细胞面板将基本、调节和 T 细胞激活/耗竭面板的实用性结合到对组织内 T 细胞谱的综合分析中。 上述数据显示了（A）使用 4T1 乳腺癌模型在小鼠肿瘤中的 CD4+/CD8+ T 细胞亚群分析，（B）携带 CT.26 结直肠腺癌小鼠脾脏中的调节性 T 细胞分析，以及（C）来自 A20（B 细胞淋巴瘤）细胞系衍生肿瘤的 T 细胞亚群中的 CTLA-4、PD-1 和 Ki-67 表达水平。
NK 细胞亚群以其抗肿瘤活性和控制许多肿瘤生长的能力而闻名。 DC 具有促肿瘤和抗肿瘤功能，是基于疫苗的免疫疗法的靶点。 NKDC（又名 IKDC）已被证明具有 NK 细胞和 DC 的功能特征。 自然杀伤细胞面板可用于识别这些子集。 上述研究旨在量化肿瘤来源的 Ly6G-Ly6C- 免疫细胞中 NK 细胞、DC 和 NKDC 亚群的百分比。
MDSC 亚群可以影响多种促肿瘤反应，包括抑制免疫功能，并且是免疫治疗的一个有吸引力的靶点。 它们是一个异质细胞群。 其表型可以通过肿瘤微环境中的信号来塑造。 上述数据展示了 MDSC 面板如何用于 CT.26 衍生肿瘤中粒细胞（G-）和单核细胞（M-）MDSC 亚群的基本鉴定。 CD11b+ 髓系细胞在 CD3+CD19+ 淋巴细胞排除后首次在 CD45+ 门中被鉴定出来。 根据 Ly-6G 和 Ly-6C 表面受体的表达进一步区分 G-MDSC 和 M-MDSC。
扩展的骨髓面板是基本 MDSC 面板的扩展，除了 MDSC 群体之外，还可以分析 NK 和 DC 亚群。 在所示数据中，这些亚群在 CT.26 衍生的肿瘤中进行了分析。 单核细胞（M-）和粒细胞（G-）MDSC 分别表达高水平的 Ly-6C 和 Ly-6G 蛋白（Bright）并共表达 CD11b 标记物。 在 MDSC 排除门中分析 NK 和 DCs，并根据广谱 NK 标记（CD49b 和 CD335）与 DC 特异性 CD11c 蛋白表达进一步区分。 红色和灰色峰分别代表 CD11b 染色和未染色的细胞。
综合骨髓检测面板以基本骨髓衍生抑制细胞检测面板为基础，可对骨髓细胞群进行更深入的分析。 它还能够分析肿瘤和免疫细胞亚群上的免疫抑制受体 PD-L1。 上述数据展示了如何使用综合髓系面板来 A）测量肿瘤和免疫细胞上的 PD-L1 表达（4T1 乳腺癌模型），B）量化巨噬细胞和树突状细胞亚群（CT.26 结直肠肿瘤模型），以及 C）表征 MDSC 亚群的 CD115 表达情况，这是一种已被证明与抑制活性直接相关的受体（CT.26 结直肠肿瘤模型）。 该组合还有助于分析中性粒细胞和单核细胞群（未显示）。 红色和灰色峰分别代表靶抗原染色的细胞和未染色的细胞。
M1 和 M2 巨噬细胞是驻留在肿瘤微环境中的两个主要巨噬细胞群。 它们在癌症进展方面具有相反的功能，因此是新免疫疗法的靶点。 上述研究展示了如何使用 M1 和 M2 肿瘤相关巨噬细胞面板来分析这两组的比率。 为此，排除了 MDSC 亚群，以便鉴定 CD11b+/F480+ 巨噬细胞。分析了该部分的 M2 巨噬细胞（CD206+）和 M1 巨噬细胞（CD206-MHCII+）。
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使用我们预先验证的光谱面板和光谱流式细胞术方面的专业知识，提高数据清晰度、提升灵活性并从小样本中产生有影响力的结果。
