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スペクトルフローサイトメトリー機能

フルスペクトラム技術は、フローサイトメトリーの性能と柔軟性を次のレベルに引き上げ、優れた分解能で深い免疫表現型解析機能を提供します。
  • より深い免疫プロファイリングのためのスペクトルアンミキシング

  • パネルをカスタマイズするための直感的なパネルデザイン

  • 感度と分解能を向上させる自家蛍光抽出

スペクトルフローサイトメトリーはどのように機能しますか?

スペクトルフローサイトメトリーは、独自の光学収集および分析機能を備えており、アプリケーションごとにシステムを再構成することなく、幅広い蛍光色素の組み合わせを使用できるため、シンプルで直感的な操作で優れた感度が得られます。 フルスペクトルシグネチャは、さまざまな細胞型を同定するために使用される細胞マーカーに結合した蛍光色素ごとに生成されます。 次に、マルチカラーサンプルに存在する異なるシグネチャを混合解除して、同じサンプルで発光ピークに近い蛍光色素を使用できるようにします。 この蛍光色素オプションとパネルサイズの可能性の拡大、および真空動力の流体システムにより、Cytek® Auroraスペクトルフローサイトメトリーは、独自のバイオマーカーシグネチャが求められる研究や、サンプルの入手可能性が制限されている研究に特に適しています。

従来のフローサイトメーターでは、パシフィックブルーとブリリアントバイオレット421(BV421)は、スペクトルシグネチャが似すぎているため、一緒に使用することはできません。


従来のフローサイトメーターでは、パシフィックブルーとブリリアントバイオレット421(BV421)は、スペクトルシグネチャが似すぎているため、一緒に使用することはできません。 スペクトルフローサイトメトリーでは、パシフィックブルーとBV421は、組み合わせて使用するのに十分なスペクトルシグネチャ(複雑度指数0.78)を持っています。

スペクトルフローサイトメトリーの利点
 

検出能力の向上

5つのレーザーと64個の蛍光検出器

より大きな柔軟性

光学フィルターを再構成することなく、さまざまな新しい蛍光色素の組み合わせを使用

抜群の感度

  • 発光ピークに近い蛍光色素の分離
  • 自家蛍光抽出によるデータの明瞭さの向上

その他の色

同じマルチカラーサンプルで最大40種類の細胞型/ターゲットを検出

高価値システム

より小さなサンプルサイズから生成されたより大きなデータセット

完全な分析互換性と使い慣れたワークフローを備えた高度なテクノロジー

スペクトルフローサイトメトリーは、従来のフローサイトメトリーに比べていくつかの利点があると同時に、t-Distributed Stochastic Neighbor Embedding(tSNE)解析などのマルチパラメータフローサイトメトリーデータの複雑な解析に対応しており、パネル内のすべてのマーカーの偏りのない解析を行うことができ、他の方法では発見されない細胞サブセット内の表現型の変化を識別するのに役立ちます。 スペクトルフローサイトメトリーは、従来のフローサイトメトリーのすべての機能を備え、同じワークフローに従い、同じ要件を共有しながら、その機能を拡張します。

4T1-Luc2-1A4 tSNE分析 従来のゲーティング集団をtSNEマップにプロットすることにより、治療グループ間のパネルマーカーの発現の変化(集団シフト)を視覚化できます。

    完全な分析互換性と使い慣れたワークフローを備えた高度なテクノロジー

    小さなサンプルから得た大きな洞察

    当社の専門フローサイトメトリーチームは、in vivo  研究の深い免疫表現型調査を実施し、試験剤の治療によって引き起こされる免疫応答の変化を捉えます。 以下は、当社の標準スペクトルパネルのリストです。 これらのパネルには、追加のマーカーを組み込む能力があり、アッセイのニーズに合わせて完全にカスタムパネルを開発できます。

    19種類の骨髄サブセットの免疫表現型解析を提供

    抗体/色素

    説明

    CD45

    汎造血細胞マーカー

    CD45(マウス)

    マウス免疫細胞の排除

    CD3

    汎T細胞マーカー

    CD4

    CD4+ T細胞マーカー

    CD8

    CD8+ T細胞マーカー

    FoxP3

    制御性T細胞マーカー

    CD56

    ナチュラルキラー/ナチュラルキラーT細胞マーカー

    CD16

    分化マーカー

    CD19

    B細胞マーカー

    CD20

    B細胞マーカー

    CD11b

    汎骨髄系統マーカー

    CD68

    マクロファージマーカー

    HLA-DR

    M1マクロファージマーカー

    CD163

    M2マクロファージマーカー

    CD14

    単球マーカー

    CD33

    骨髄の区別

    CD84

    MDSCマーカー

    CD11c

    樹状細胞マーカー

    BDCA3 (CD141)

    DC1サブセット マーカー

    BDCA1 (CD1c)

    DC2サブセット マーカー

    CCD123

    pDCマーカー/好塩基球マーカー

    CD66b

    好中球マーカー

    CD15

    好中球マーカー

    CD86

    成熟マーカー

    生存染料

    死細胞除外

    絶対カウント、13のリンパ系および骨髄系サブセットの定量、メモリーT細胞測定、12の機能マーカーの分析を提供し、T細胞、樹状細胞、マクロファージ、MDSCの表現型をプロファイリングします。

    パネル1: 抗体/色素

    説明

    CD45

    汎造血細胞マーカー

    CD3

    汎T細胞マーカー

    CD4

    CD4+ T細胞マーカー

    CD8

    CD8+ T細胞マーカー

    FoxP3

    制御性T細胞マーカー

    CD25

    制御性T細胞マーカー

    CD44

    アクティベーション/メモリーマーカー

    CD62L

    ナイーブT細胞/メモリマーカー

    PD-1

    活性化/枯渇マーカー

    CD69

    アクティベーションマーカー

    LAG-3

    活性化/枯渇マーカー

    TIM-3

    枯渇マーカー

    ICOS

    アクティベーションマーカー

    グランザイムB

    細胞毒性マーカー

    CKi-67

    増殖マーカー

    CD49b/CD335

    ナチュラルキラー/ナチュラルキラーT細胞マーカー

    CD19

    B細胞マーカー

    CD11b

    汎骨髄系統マーカー

    Ly-6G

    顆粒球-MDSC/好中球マーカー

    Ly-6C

    単球-MDSC/単球マーカー

    CD11c

    樹状細胞マーカー

    CD24

    樹状細胞の識別

    F4/80

    汎マクロファージマーカー

    MHCクラスII

    M1マクロファージ&樹状細胞マーカー

    CD206

    M2マクロファージマーカー

    CD103

    DC1サブセット マーカー

    XCR1

    交差提示/移動性樹状細胞マーカー

    CD80

    成熟マーカー 

    CD86

    成熟マーカー

    MARG1

    ミエロイド機能マーカー

    iNOS

    ミエロイド機能マーカー

    PD-L1

    免疫抑制

    生存染料

    死細胞除外

     

    パネル2: 抗体/色素

    説明

    蛍光球ビーズのカウント

    細胞計数試薬

    CD45

    汎造血細胞マーカー

    生存染色

    死細胞除外

    11の活性化マーカーと枯渇マーカーを組み合わせて、T細胞、NK、B細胞のサブセットに詳細な表現型分析を提供します。 ナイーブ幹細胞記憶、中枢記憶、エフェクター記憶、末端エフェクター、および組織常在記憶 (Trm) サブセットの描写が含まれます。

    抗体/色素

    説明

    CD45

    汎造血細胞マーカー

    CD3

    汎T細胞マーカー

    CD4

    CD4+ T細胞マーカー

    CD8

    CD8+ T細胞マーカー

    TCRgd

    ガンマデルタT細胞マーカー

    フォックスP3

    制御性T細胞マーカー

    CD25

    活性化/制御性T細胞マーカー

    CD69

    アクティベーションマーカー

    LAG3

    活性化/枯渇マーカー

    CD27

    アクティベーションマーカー

    ICOS

    アクティベーションマーカー

    TIM3

    枯渇マーカー

    PD-1

    活性化/枯渇マーカー

    TIGIT

    枯渇マーカー

    TCF7

    枯渇マーカー

    グランザイムB

    細胞毒性マーカー

    CXCR5

    T細胞募集

    CXCR3

    T細胞募集

    CD56

    ナチュラルキラー/ナチュラルキラーT細胞マーカー

    CD16

    ナチュラルキラー/ナチュラルキラーT細胞マーカー

    CD19

    B細胞マーカー

    CD20

    B細胞マーカー

    Ki-67

    増殖マーカー

    CD45RA

    メモリーT細胞の同定

    CD45RO

    メモリーT細胞の同定

    CCR7

    メモリーT細胞の同定

    CD62L

    メモリーT細胞の同定

    CD95

    メモリーT細胞の同定

    CD103

    メモリーT細胞の同定

    生存率染料

    死細胞除外

    スペクトルフローサイトメトリー機能FAQ

    スペクトルフローサイトメトリーは、以下のシナリオにおいて、従来のフローサイトメトリーに比べて独自の利点があります。

    • サンプルの入手可能性が限られている場合
    • 最大40のターゲットを分析するためにディープイムノプロファイリングが必要な場合
    • 肺組織など自家蛍光の強いサンプルタイプを分析する場合
    • 固有のバイオマーカーシグネチャを求める場合
    • 100 nmの小さな粒子を分析する必要がある場合

    ヒトサンプルとマウスサンプルの両方に対応するスペクトル免疫表現型検査パネルがあります。

    • Spectral Human CompLeukocyte™パネル
    • Spectral Human CompLymphocyte™パネル
    • Spectral Expanded CompLeukocyte™(マウス)パッケージ
    • Cytek®検証済みパネルは、こちらで提供されているように使用することもできます cytekbio.com/collections/kits

    365-829 nmの範囲で発光する色素は、高感度の粗波長分割多重半導体アレイで効率的に捕捉できます。