Démixage spectral pour un immunoprofilage plus poussé
Conception intuitive pour la personnalisation des panneaux
Extraction de l'autofluorescence pour une sensibilité et une résolution améliorées
La cytométrie en flux spectral offre des capacités uniques de collecte optique et d’analyse permettant l’utilisation d’une large gamme de combinaisons de fluorochromes sans reconfigurer le système pour chaque application, ce qui se traduit par une sensibilité exceptionnelle avec des opérations simples et intuitives. Des signatures à spectre complet sont générées pour chaque fluorochrome lié à des marqueurs cellulaires qui sont utilisés pour identifier différents types de cellules. Les différentes signatures présentes dans un échantillon multicolore sont ensuite démélangées pour permettre l’utilisation de fluorochromes avec des pics d’émission proches dans le même échantillon. Cette expansion des options de fluorochrome et du potentiel de taille de panneau, ainsi que le système fluidique alimenté par le vide, rendent la cytométrie en flux spectral Cytek® Aurora particulièrement adaptée aux études où des signatures de biomarqueurs uniques sont recherchées ou où la disponibilité des échantillons est limitée.
Dans un cytomètre en flux conventionnel, le bleu pacifique et le violet brillant 421 (BV421) ne peuvent pas être utilisés ensemble car les signatures spectrales sont trop similaires. En cytométrie spectrale en flux, le bleu pacifique et le BV421 ont suffisamment de distinctions (un indice de complexité de 0,78) dans leurs signatures spectrales pour être utilisés en combinaison.
5 lasers avec 64 détecteurs de fluorescence
Utilisation d’un large éventail de nouvelles combinaisons de fluorochromes sans avoir besoin de reconfigurer les filtres optiques
Détection de jusqu’à 40 types de cellules/cibles différents dans le même échantillon multicolore
Ensembles de données plus volumineux générés à partir d’échantillons de plus petite taille
La cytométrie spectrale en flux offre plusieurs avantages par rapport à la cytométrie en flux conventionnelle et se prête en même temps à des analyses complexes de données de cytométrie en flux multiparamétriques, telles que l’analyse t-Distributed Stochastic Neighbor Embedding (tSNE) qui permet une analyse impartiale de tous les marqueurs du panel pour aider à discerner les changements phénotypiques au sein des sous-ensembles cellulaires qui ne seraient autrement pas découverts. La cytométrie en flux spectrale possède toutes les capacités de la cytométrie en flux conventionnelle, suit le même flux de travail et partage les mêmes exigences, tout en élargissant ses fonctionnalités.
Analyse tSNE 4T1-Luc2-1A4 Le tracé des populations de sélection traditionnelles sur la carte tSNE permet de visualiser les changements dans l’expression de n’importe quels marqueurs de panel (changements de population) entre les groupes de traitement
Notre équipe d’experts en cytométrie en flux peut effectuer une enquête approfondie d’immunophénotypage de votre étude in vivo afin de capturer les changements qui se produisent dans la réponse immunitaire déclenchée par le traitement de l’agent testé. Vous trouverez ci-dessous une liste de nos panneaux spectraux standard. Ces panneaux peuvent accueillir des marqueurs supplémentaires et des panneaux entièrement personnalisés peuvent être développés pour vos besoins d'analyse.
Fournit une analyse immunophénotypique de 19 sous-ensembles myéloïdes distincts
Anticorps/colorant | Description |
CD45 | Marqueur cellulaire pan-hématopoïétique |
CD45 (souris) | Exclusion des cellules immunitaires de la souris |
CD3 | Marqueur pan-T |
CD4 | Marqueur des lymphocytes T CD4+ |
CD8 | Marqueur des lymphocytes T CD8+ |
FoxP3 | Marqueur régulateur des lymphocytes T |
CD56 | Marqueur de tueur naturel/lymphocytes T tueur naturel |
CD16 | Marqueur de différenciation |
CD19 | Marqueur de lymphocytes B |
CD20 | Marqueur de lymphocytes B |
CD11b | Marqueur de lignée pan-myéloïde |
CD68 | Marqueur macrophage |
HLA-DR | Marqueur macrophage M1 |
CD163 | Marqueur macrophage M2 |
CD14 | Marqueur monocytaire |
CD33 | Délimitation myéloïde |
CD84 | Marqueur MDSC |
CD11c | Marqueur de cellules dendritiques |
BDCA3 (CD141) | Marqueur de sous-ensemble DC1 |
BDCA1 (CD1c) | Marqueur de sous-ensemble DC2 |
CCD123 | Marqueur pDC/Marqueur basophile |
CD66b | Marqueur neutrophile |
CD15 | Marqueur neutrophile |
CD86 | Marqueur de maturation |
Teinture de viabilité | Exclusion des cellules mortes |
Fournit des numérations absolues, la quantification de 13 sous-ensembles lymphoïdes et myéloïdes, des mesures de lymphocytes T mémoires et l’analyse de 12 marqueurs fonctionnels pour profiler les phénotypes de lymphocytes T, de cellules dendritiques, de macrophages et de MDSC
Panneau 1 : Anticorps/colorant | Description |
CD45 | Marqueur cellulaire pan-hématopoïétique |
CD3 | Marqueur pan-T |
CD4 | Marqueur des lymphocytes T CD4+ |
CD8 | Marqueur des lymphocytes T CD8+ |
FoxP3 | Marqueur régulateur des lymphocytes T |
CD25 | Marqueur régulateur des lymphocytes T |
CD44 | Marqueur d’activation/mémoire |
CD62L | Marqueur de cellule T naïve/mémoire |
PD-1 | Marqueur d’activation/d’épuisement |
CD69 | Marqueur d’activation |
LAG-3 | Marqueur d’activation/d’épuisement |
TIM-3 | Marqueur d’épuisement |
ICOS | Marqueur d’activation |
Granzyme B | Marqueur de cytotoxicité |
CKi-67 | Marqueur de prolifération |
CD49b/CD335 | Marqueur de tueur naturel/lymphocytes T tueur naturel |
CD19 | Marqueur de lymphocytes B |
CD11b | Marqueur de lignée pan-myéloïde |
Ly-6G | Granulocytaire-MDSC / Marqueur neutrophile |
Ly-6C | Monocytaire-MDSC/Marqueur monocytaire |
CD11c | Marqueur de cellules dendritiques |
CD24 | Délimitation des cellules dendritiques |
F4/80 | Marqueur pan-macrophage |
CMH de classe II | Macrophage M1 et marqueur de cellules dendritiques |
CD206 | Marqueur macrophage M2 |
CD103 | Marqueur de sous-ensemble DC1 |
XCR1 | Marqueur de cellules dendritiques de présentation croisée/migratrices |
CD80 | Marqueur de maturation |
CD86 | Marqueur de maturation |
MARG1 | Marqueur fonctionnel myéloïde |
iNOS | Marqueur fonctionnel myéloïde |
PD-L1 | Immunosuppression |
Teinture de viabilité | Exclusion des cellules mortes |
Panneau 2 : Anticorps/colorant | Description |
Comptage des billes de fluorosphère | Réactif de dénombrement cellulaire |
CD45 | Marqueur cellulaire pan-hématopoïétique |
Teinture de viabilité | Exclusion des cellules mortes |
Fournit une analyse phénotypique approfondie des sous-ensembles de cellules T, NK et B, combinant 11 marqueurs d’activation et d’épuisement. On y trouve la délimitation des sous-ensembles de la mémoire des cellules souches naïves, de la mémoire centrale, de la mémoire effectrice, de l’effecteur terminal et de la mémoire résidente tissulaire (Trm).
Anticorps/colorant | Description |
CD45 | Marqueur cellulaire pan-hématopoïétique |
CD3 | Marqueur pan-T |
CD4 | Marqueur des lymphocytes T CD4+ |
CD8 | Marqueur des lymphocytes T CD8+ |
TCRgd | Marqueur de lymphocytes T gamma Delta |
FoxP3 | Marqueur régulateur des lymphocytes T |
CD25 | Marqueur de lymphocytes T d’activation/régulation |
CD69 | Marqueur d’activation |
LAG3 | Marqueur d’activation/d’épuisement |
CD27 | Marqueur d’activation |
ICOS | Marqueur d’activation |
TIM3 | Marqueur d’épuisement |
PD-1 | Marqueur d’activation/d’épuisement |
TIGIT | Marqueur d’épuisement |
TCF7 | Marqueur d’épuisement |
Granzyme B | Marqueur de cytotoxicité |
CXCR5 | Recrutement des lymphocytes T |
CXCR3 | Recrutement des lymphocytes T |
CD56 | Marqueur de tueur naturel/lymphocytes T tueur naturel |
CD16 | Marqueur de tueur naturel/lymphocytes T tueur naturel |
CD19 | Marqueur de lymphocytes B |
CD20 | Marqueur de lymphocytes B |
Ki-67 | Marqueur de prolifération |
CD45RA | Délimitation des lymphocytes T mémoire |
CD45RO | Délimitation des lymphocytes T mémoire |
CCR7 | Délimitation des lymphocytes T mémoire |
CD62L | Délimitation des lymphocytes T mémoire |
CD95 | Délimitation des lymphocytes T mémoire |
CD103 | Délimitation des lymphocytes T mémoire |
Teinture de viabilité | Exclusion des cellules mortes |
La cytométrie en flux spectrale présente des avantages uniques par rapport à la cytométrie en flux conventionnelle dans les scénarios suivants :
Nous disposons de panels d’immunophénotypage spectral pour les échantillons humains et murins :
Les colorants émettant dans la gamme 365-829 nm peuvent être capturés efficacement avec les réseaux de semi-conducteurs à multiplexage par répartition en longueur d’onde grossière très sensibles.
